鹧鸪单核细胞增多性李氏杆菌感染的诊治

李氏杆菌病又称单核白细胞增多病，是人畜共患的散发性传染病之一，家禽也易感染发病，有时会给养殖户造成很大损失。2004年2月临沂市一农户饲养的600余只鹧鸪（已接近产蛋），发生了一种以败血症、神经症状、下痢为主要症状的疾病。据统计，发病率在36%左右，致死率约57%，造成较大的经济损失。笔者经过临床检查和实验室诊断，确诊为鹧鸪单核细胞增多性李氏杆菌感染，采取中西结合综合性防治措施，控制了病情的发展，现将诊治情况报道如下。1发病情况据技术员介绍，2月3日首先发现3只鹧鸪突然死亡，无任何临床症状;2月5日又发现数只发病，并表现神经症状和下痢，最后死亡;以后发病数量逐渐增多，每天都有数只甚至几十只死亡。发病后立即进行治疗，曾用青霉素、庆大霉素和大青叶等治疗，但收效不大，不能制止死亡，随来我院求医。2临床症状发病前临床症状不明显，往往不易察觉，突然发病。发病后有的精神委顿，羽毛蓬松无光，下痢，肛门周围羽毛沾有黄绿色稀便;有的呼吸困难，口流黏液，食欲下降，饮水减少;病鸪严重脱水，腹部膨大，皮肤呈暗紫色，迅速死亡;部分病鸪表现神经症状，无目的地乱跑乱撞，倒地侧卧，两肢不停地划动或痉挛，头颈歪斜或后仰，呈现角弓反张姿势，不久即发生死亡，病程一般2～6天。3病理变化对死亡的15只鹧鸪进行剖检，其变化如下：心冠脂肪出血，心外膜有出血点，心肌有小坏死灶，心脏内充满血凝块;脾脏、肾肿大;肝肿大、质脆、土黄色，表面有许多大小不一的出血点和坏死小点;肺瘀血和灶性炎症;脑膜和脑实质血管充血水肿，有出血灶，脑脊髓液增多、混浊，脑干变软;腺胃、肌胃出血，黏膜脱落，肠道弥漫性出血;胸肌出血、小灶坏死。组织学检查，发现脑实质毛细血管充血明显，部分有出血灶，血管周围有中等量炎症细胞浸润，血管上皮细胞变性、肿大;肝实质瘀血明显，各小叶的窦状隙充满红细胞，肝细胞变性浊肿，汇管区有中量炎症细胞浸润;脾髓瘀血，有大量红细胞形成片状红染，脾小梁变性，脾小结缩小，界限明显。4实验室诊断4.1镜检无菌操作取病死鹧鸪的肝、脾、血、脑脊髓液及脑桥等病料，分别进行涂片、革兰氏染色，油镜下观察，发现革兰氏阳性、两端钝圆的短小杆菌，多单在，有的排列呈"V"字形或平行排列的，肝脏、脑组织中含菌量较多。4.2病原菌分离培养无菌操作取新鲜病死鹧鸪脑脊髓液病料划线接种于0.5%葡萄糖羊血清琼脂平板，于含5%～10%的二氧化碳低氧环境中37℃培养观察18～24h，可见圆形、湿润、光滑的小菌落，反光观察菌落呈现淡蓝色;培养48h后，菌落增大，其色灰暗，在菌落周围有溶血环。菌落形成后移植到0.05%亚碲酸钾血清琼脂培养基上培养，形成圆形、隆起、湿润、直径约为0.6mm的黑色菌落;在肉浸液中培养呈均匀浑浊生长，表面有薄膜形成;在半固体培养基中，于37℃24h后生长物沿穿刺线以云雾状向四周蔓延，在培养基表面下3～5mm处形成宛如伞状的界面;普通琼脂培养基上36h形成圆形整齐、扁平的蓝灰色半透明的中等大小菌落，反射光下呈乳白色。挑取单个存在的菌落涂片，革兰氏染色检查，看到非常一致的革兰氏阳性杆菌，两端钝圆，长约2μm，菌形微弯，两极染色明显，有呈"V"字形排列的细菌，也有3个细菌叠成栅状的。4.3生化试验将分离菌接种葡萄糖、鼠李糖、杨苷，在24h内产酸;在7～12天内可使蔗糖、麦芽糖、乳糖、甘油、淀粉及糊精产酸，均不产气。发酵单乳糖、棉实糖、山梨醇及木糖很慢或不一致。不产硫化氢和靛基质，不还原硝酸盐，不液化明胶。石蕊牛乳在24h内微酸变色，但不凝固牛乳。MR试验（＋）、V-P试验（＋）。基本符合李氏杆菌的特性。4.4动物接种试验取小鼠4只，每只腹腔接种0.2ml肉汤培养物，接种鼠全部在3～4天内死亡。剖检发现，肝、脾有小坏死灶，细菌涂片检查、分离培养均与上述病样中病原特征相同。同时用细菌的肉汤培养物给家兔点眼，24h出现结膜炎，很快死亡。根据以上诊断，可确诊本次疾病为鹧鸪的单核细胞增多性李氏杆菌感染。5饲料病原检验据介绍，鹧鸪场内外常有四肢运动失调和死亡的老鼠，而且场内为安全起见也未用化学灭鼠药品。我们到饲料仓库检查发现，所用玉米、豆饼等部分饲料被老鼠粪尿污染，在多处分别取被老鼠污染的饲料各10g，制成浸液接种于肉汤培养基中4℃下增菌培养后，取0.2ml培养液接种于10ml硫氰化钾胰胨肉汤中，24℃下培养48h，然后用血液琼脂进行分离培养，37℃24h后形成圆形、光滑、半透明的β溶血的露滴样菌落，纯培养物进行各项生物学特征鉴定，均与上述病料中病原相同。说明本次疾病由老鼠粪便污染饲料造成传播所致。6药敏试验对分离菌用常规纸片法进行药物敏感试验，结果对磺胺嘧啶钠、氨苄青霉素、红霉素敏感，其抑菌圈在15mm以上;对青霉素、氯霉素等有一定程度的耐药性。7防治措施7.1采取紧急措施，防止疾病传播加强鹧鸪的饲养管理，立即更换饲料，搞好清洁卫生，饲槽内剩料及时清理;做好紧急灭鼠工作;做好消毒工作，用3%～5%来苏儿和0.5%菌毒灭交替对鹧鸪舍环境进行消毒，每天1次，2周后，改为1周2次;对被污染的粪尿及病死蛋鹧鸪作无害化处理，以防止疾病继续传播;对场内所有鹧鸪群用磺胺嘧啶钠饮水预防3天。7.2治疗对发病鹧鸪采用磺胺嘧啶钠按0.1g/kg肌肉注射，首量加倍，每天早晚两次，连续治疗2～5天。并根据病情可以配合选用碳酸氢钠、维生素C、可的松、葡萄糖和镇静药物冬眠灵等进行辅助治疗，饮水中加入红霉素1～3天。配合中药治疗：金银花100g、菊花100g、柴胡100g、茵陈60g、黄芩60g、茯苓60g、远志60g、生地60g、木通60、车前草60g、琥珀10g等混合水煎供100～200只鹧鸪1天内服（饮水、拌料），连用3～5天。经过采取以上综合防治措施，3天后症状明显好转，除严重病例不能制止死亡外，1周后发病蛋鹧鸪恢复正常，但有个别出现神经性后遗症。1月后回访无新的病例发生。8讨论与分析8.1根据临床症状、病理变化、微生物检查及饲料的病原菌检验，确诊该病为鹧鸪李氏杆菌病，但应注意与沙门氏菌杆病和一些有神经症状的病毒性传染病相区别。8.2根据调查和饲料病原菌检验，笔者认为本病发生的主要原因一是由带菌老鼠粪污染鹧鸪饲料，蛋鹧鸪通过消化道而感染发病;二是由于该场离村庄不远，周围又是农田、树林，鼠类较多，加上吸血昆虫的叮咬传播，从而造成其流行;三是被病鹧鸪污染的饲料、饮水、用具等引起;四是各种应激因素的影响，如气候的骤变等。因此，加强饲养管理，如鹧鸪场灭鼠、消灭蚊蝇也是一项非常重要的工作，不可忽视。8.3李氏杆菌病是一种人畜共患病，人也容易感染发病，因此场内饲养员、技术人员等应注意做好自身的防护。8.4李氏杆菌病尚无效果可靠的疫苗，该菌易产生耐药性，建议加强鹧鸪饲养管理，避免鼠粪污染饲料，预防该病的发生。在治疗本病时，应注意做好药敏试验，选择治疗效果最优的抗生素，才能达到满意效果。如果能配合中药治疗，效果更好。