随着东北地区香菇栽培面积的不断扩大,香菇品种也在逐年更新。组织分离方法是一种香菇无性繁殖方法,这种分离母种方法,操作简便,其繁殖的后代变异小,能保持原菌株的优良特性,因此大多数科研院校及制种单位,在品种审定后,都采用这种方法来保持菌株的优良种性,并用其原始母种扩繁原种及栽培种,并应用于生产。一般3~4年后,菌株才开始逐渐表现出衰老退化现象。1.分离用种菇的选择在优良品种出菇选择单菇重量大、菌盖圆整、菌柄细短、菌肉厚实、颜色鲜、有鳞片且无病虫害的单菇,要求开伞度在7~8分正处在正常生长中的种菇。2.种菇的消毒处理选好的种菇带入接种室内,剪去菇根,用消毒镊子夹住菌柄,并用1%的升汞水或用75%的医用酒精擦拭消毒2~3遍,然后将分离用工具用常规法消毒后移入无菌分离区。3.分离种菇的组织块在无菌条件下,用酒精擦手消毒后,用手纵向将种菇掰开,迅速用接种刀将掰开菇的菌盖和菌柄的交界处菌肉上横划两刀,并在划口中间每隔2毫米竖划一刀,及时用镊子夹取组织块,迅速接入试管斜面培养基中间部位,并用镊子稍压一下,以保证组织块与培养基充分接触。4.母种的培养接种后将试管放在温度23~25℃的培养箱中,经2~3天,可见组织块周围有灰白色放射状的菌丝,再过1~2天菌丝开始蔓延到试管斜面上。大约12~15天菌丝可长满整个试管,选择菌丝洁白粗壮、整齐一致平铺于斜面上的试管留作母种,其余淘汰。母种经低温复壮后就可以扩繁原种、栽培种及进行出菇试验。