需注意猪瘟病毒、链球菌、绿脓杆菌和支原体的混合感染

四川省某猪场于2004年3～4月发生了以病猪精神沉郁，体温升高至41～42℃，四肢、背、腹下、尾等部位皮肤有出血斑，发病快，死亡率高为特点的疾病。经临床检查、流行病学调查、病理剖检和实验室诊断，将此次疫情确诊为猪瘟病毒、链球菌、绿脓杆菌和支原体混合感染。现将诊疗情况报告如下。1发病情况该猪场有大小猪只1700多头，品种为大约克和杜洛克。猪群自2004年3月12日开始发病，发病的多为体重50kg以上的肥猪和后备母猪，经产母猪及体重40kg以下的猪不发病。2临床表现此次疫情以急性发病为主，多数发病猪体温升高至41～42℃。初期便秘，后期排暗红色液状粪便。病猪病初表现为食欲不振或废绝，精神沉郁，行动迟缓，呼吸闲难、咳嗽、气喘，眼结膜潮红，分泌物增多。随着病情的发展，病猪全身肌肉发颤，站立不稳，后躯摇摆。病猪死前体温下降，前后肢作游泳状摆动，大多数发病公猪的包皮积尿，挤压后排出灰白色腥臭脓汁。病程稍长的猪由于废食，体质逐渐瘦弱，最终衰竭死亡。3病理剖检共削检19头病死猪，病理变化大致相同。病猪犬齿和门齿两旁呈对称性溃疡，两耳、四肢下端、胸、背、腹部和尾部呈玫瑰红色，剖开后血液凝固不良；淋巴结多数肿大，呈暗红色，周边出血，切面呈大理石样花纹；脾呈暗红色，脾脏边缘有红色颗粒状凸起，并有蚕豆大小的三角形梗死灶，呈锯齿状突出于脾表面；胆囊充盈，胆汁黏稠呈墨绿色，胆囊黏膜有针尖大小的弥漫性出血点；肾脏稍肿大，肾脏表面有芝麻粒大小的出血点，切开肾脏，可见肾皮质和肾乳头出血；心包积液，心脏质地柔软，心外膜表面有黄色胶冻状物质环绕心脏，冠状沟两旁有针尖大小的出血点；喉头和气管黏膜充血潮红，气管内充满血红色泡沫，喉头软骨处有条纹状出血；肺的尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘有“肉”样病变，切开肺脏流出白色黏稠的脓汁；肺门淋巴结、纵膈淋巴结呈暗紫红色，肿大，切面外翻，周边出血；胃的底部黏膜大面积瘀血或出血，黏膜易脱落；大、小肠肠壁变薄，十二指肠、空肠和结肠黏膜广泛充血或出血，回盲瓣有钮扣状溃疡，有的表面形成黑色结痂；肠系膜淋巴结肿大，呈暗红色，周边出血，呈大理石样外观；膀胱黏膜有弥漫性出血点。4　实验室检验4.1直接涂片取病猪的肺、肝、脾、淋巴结涂片，经革兰氏染色、镜检，可见单个或成双排列，间或3～4个菌体相连呈短链状的革兰氏阳性球菌与单个、成双或成堆排列的革兰氏阴性短小杆菌。4.2细菌分离培养与观察无菌采取病死猪的肺脏、淋巴结、脾和关节液接种于普通营养琼脂、麦康凯琼脂平皿和普通肉汤中，置37℃下培养24小时，培养基均有细菌生长。肉汤培养基变浑浊，管底有沉淀，有白色菌膜生成，普通肉汤上层约1cm处出现蓝绿色荧光色素。在普通琼脂培养基上长出2种不同的菌落。一种菌落为生长良好、光滑、湿润、微隆起、边缘整齐或呈波状的中等大小的菌落，能产生蓝绿色荧光色素，使培养基变成绿色，培养物有特殊的芳香味。挑取典型菌落涂片染色，镜检为革兰氏阴性短小杆菌，常单个或成双排列。另一种菌落生长不良，偶见零散、呈灰白色、半透明状、光滑的细小菌落。涂片染色镜检为革兰氏阳性的细小球菌，常单个或3～4个连成短链。再接种于鲜血琼脂培养基上，长出一种密布均匀、表面光滑、呈针尖大小、半透明、不溶血的菌落。挑取该菌落涂片，染色镜检为革兰氏阳性的链球菌，多数单个或3～4个连成短链。麦康凯琼脂培养基上长出一种光滑、湿润、微隆、边缘整齐或呈波浪状的中等大小的灰白色菌落，能产生蓝绿色荧光色素，使培养基变成绿色。挑取菌落涂片染色，镜检为革兰氏阴性短小杆菌，常单个或成双排列。4.3生化试验取上述2种典型菌落经2次纯化后的纯培养物做生化试验，结果表明，革兰氏阳性菌生化试验结果与兽疫链球菌的生化特点相符，革兰氏阴性菌的生化特点与绿脓杆菌的生化特点相符。所以此革兰氏阳性菌为链球菌，革兰氏阴性菌为绿脓杆菌。4.4　动物接种试验取这2种不同细菌的肉汤纯培养物0.2mL分别腹腔接种3只小鼠，同时设3只作对照。接种革兰氏阴性菌的小鼠于接种后6小时内全部死亡，接种革兰氏阳性菌的小鼠于接种后72小时内死亡1只。而对照鼠正常。剖检发现死亡的小鼠呈败血症变化，并从小鼠脏器中分离到与病死猪体内相同的细菌。4.5药敏试验将2种细菌分别作药敏试验，该革兰氏阳性菌对青霉素、庆大霉素、氯霉素、氨苄西林、丁胺卡那霉素、痢特灵和头孢拉定高敏，对卡那霉素、环丙沙星、氧氟沙星中敏，对链霉素、红霉素、强力霉素、四环素、新霉素、乙酰螺旋霉素、壮观霉素、磺胺嘧啶等低敏；该革兰氏阴性菌对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、诺氟沙星、环丙沙星和丁胺卡那霉素高敏，对强力霉素、氧氟沙星中敏，对青霉素、氯霉素、氨苄西林、痢特灵、头孢拉定、四环素、新霉素、壮观霉素和磺胺嘧啶等低敏。5防治及时隔离病猪，深埋或焚烧病死猪，加强环境消毒，尽量减少污染面积。对疑似健康的猪群加倍剂量紧急接种猪瘟兔化弱毒疫苗，采用青霉素、丁胺卡那霉素进行治疗，病情很快得到控制。6　小结和讨论6.1经流行病学、临床症状、病理剖检、细菌学和血清学检验鉴定，确诊为猪瘟病毒、链球菌、绿脓杆菌和支原体混合感染。由于病原的多样性，使该病在流行病学、临床症状和病理变化等方面表现得非常复杂。确诊之后建议畜主用猪瘟兔化弱毒疫苗进行紧急接种，同时采用青霉素、丁胺卡那霉素进行治疗。1周回访，疫情得到控制，猪场恢复正常，这说明此次疫情诊断是正确的。6.2该猪场虽然采用超前免疫，45日龄再次加倍剂量接种猪瘟兔化弱毒疫苗，但还是发生了猪瘟，其原因是多方面的：①3月份连绵多雨，气候潮湿，是造成此次发病的外部条件之一；②猪场的饮用水是从猪场排放污水的池塘中抽取上来的，未经任何消毒处理；③猪舍的建设不合要求，大小猪舍之间相隔不到5m，且发病猪隔离不严，消毒不彻底。6.3所分离链球菌的培养物对小鼠的致病力弱，而直接用病料如关节液接种小鼠则毒力较强，这可能是因为链球菌经过人工培养，毒力减弱的缘故。该猪场曾多次发生过猪链球菌病，但由于该畜主刚接管猪场，对猪场病史不清而未接种猪链球菌疫苗。因此凡有链球菌流行史的地区，必须接种猪链球菌疫苗。6.4　猪支原体病在正常情况下死亡率不高，但此病与链球菌、猪瘟病毒等并发感染时，常造成严重的经济损失。因此，对疫情做到早发现、早诊断、早控制，是非常必要的。