狐狸人工授精技术的要点

一、前言　　狐狸人工授精技术是当今世界养狐业的一项不断深入研究并且迅速推广应用的重大项目。前苏联、挪威、芬兰、丹麦和瑞典，在该技术的研究与应用方面做了大量的工作，在芬兰，早在1985年就建立了47个狐狸人工授精站，1986年发展到了94个，拥有138名技术员。据报导，1987年北欧有近32万种狐人工授精，目前，许多养狐场的狐狸繁殖配种工作已完全由人工授精技术所替代。狐狸的人工授精技术，之所以能够在北欧一些国家中得到迅速推广，重要的经验之一是重视人员的技术培训。　　我国的狐狸人工授精技术的研究，尤其在推广与应用方面相对较晚，第一个正式的狐狸人工授精服务站始建于1994年（杜尔伯特）主要用于解决养狐生产中自然交配困难母狐的繁殖和生产兰霜狐皮，1996年东北林业大学教学科研基地的245只母兰狐，全部输以银黑狐精液，共生产兰霜狐皮900余张（当时售价1100元/张）。　　同期大连金州貂场亦率先将人工授精技术用于生产，从而获得高价格的兰霜狐皮。芬兰大体型兰狐的引进，对我国狐狸人工授精技术在生产上的应用起到了有力的推动作用，但技术人员的短缺，有碍于该技术的推广，实践证明：分期、分地区的举办短期技术培训班是可行而有效的。　　自1997年举办首届全国性狐狸人工授精培训班以来，全国已有300余名学员通过这种形式而直接获得技术，加之间接获得技术的人员，应该说会远远超过以上数目。因此，我们可预计，到了2005年，狐狸人工授精技术将在我国得以全面普及。　　另一方面，随着该技术的迅速推广与应用，不同生产场家获得的效果存在着明显的差异，重点强调的是：生产的规范一定要与技术的熟练程度成正比，反之，将会给生产带来严重的损失。在这方面我们也有过沉痛的教训。技术人员的技术水平是影响狐狸人工授精成绩的一个重要因素。　　与养狐发达国家（比如芬兰）相比，我国人工授精母狐的受孕率（根据各场反馈来的信息）高低差别较大。（高者已达到或超过了80％，低者什么情况都有，当然有些情况与管理和母狐本身状况有关）据芬兰1987年的报导，母兰狐同种输精的受孕率为80.5％，杂交输精（银黑狐♂×兰狐♀）的受孕率为83％。同时，有关资料也表明，芬兰狐狸的人工授精在初期也和我国走过同样的道路（出现感染、死亡，高者达40％）。　　二、狐狸人工授精的优点与意义　　1、减少种公狐的饲养数量，从而降低饲养成本。　　自然交配：♂：♀＝1：3～4　　人工授精：♂：♀＝1：30～50　　在加拿大每饲养100只母狐可节省费用900～6000美元（Holmes1985），（在我国若按每只公狐饲养成本300元计，则可节省5000～8000元）。　　2、用以克服兰狐系与银黑狐系的属间自然杂交困难的问题，生产适销对路的毛皮产品。　　用银黑狐精液对母兰狐输精生产兰霜狐皮每只的收入可提高35～100％。　　3、用于解决由于某些原因造成的母狐自然繁殖困难的问题，从而提高种母狐的利用率。　　4、可以提高种狐优良基因的扩散和育种效率，芬兰大体型兰狐的培养即是例证。　　三、操作间　　原则：便于操作，清静卫生。　　靠近养狐区，尽量在养狐区外，并设立相应的隔离防疫设施。　　房间大小由工作需要而定，一般15～20m2即可，分两部分于房间两侧，最好设有隔断，使用前彻底消毒。　　室温：16～20℃。　　空气：清新，不能有异味，特别是挥发性化学物质（酒精、紫外线灯、来苏儿等易忽视）。　　光线：最好利用阴面，窗应设遮光帘，可利用电灯，特别是避免直射光照。　　保持室内安静，禁止闲杂人等进入。　　四、器械的消毒　　许多病源菌可通过不洁器械在人工授精过程中使母狐生殖器官感染，从而影响母狐的生殖能力，造成不孕、流产、胎儿死亡，严重者可危及种母狐的生命。可知的病源体主要有绿脓杆菌，加德纳氏菌等。因此，凡是与母狐生殖道或公狐精液有直接或间接接触的器具必须严格消毒。　　主要消毒的器具包括：集精杯、阴道套道、输精器、发情测试仪探头、棉签及操作者手臂等。金属和玻璃器具在消毒药浸泡和刷洗后应在120℃烘干箱内烘干2h以上，与精液接触的器具应在烘干前用蒸馏水冲洗3遍。　　五、狐的人工采精　　目前多采用接摩法，其优点是：操作简便，采出的精液品质接近于自然生理状态；缺点是需要对公狐进行采精培训，狐对操作者有适应性。　　要点：公狐的外生殖器周围的剪毛与清洗；保定应自然舒适；性准备；按摩操作的连续性；指压强度适中；按摩频率；阴茎应拉接向后方；分段接取精液；对精液的保护措施；迅速稀释保存；种公狐营养（睾丸8月末9月初开始发育，11月起发育明显），采精频率；银黑狐的采精特点；采精时间；初次采精（建议在配种前全部采一遍）；电刺激法采精。　　六、精液品质检查　　　　目的：选出具有较高受精潜力的精液，淘汰劣质精液，最后得出可用于母狐输精的份数。　　用于测定精液品质的方法应准确而有效，但至今为止尚没有一个单独的测定方法能精确地预示某一精液样本的受精力，常以精液中精子的密度和活力算出样本中有效精子的数量，来确定可用于输精的份数，而精子的畸型率在小于20％时往往被忽略不计。目前研究表明，一个输精剂量中有效精子的数量在不低于2千万时对母狐的受孕率不会造成影响，但由于目前我们检测方法的粗糙，往往出现误差，因此建议生产中一个输精剂量有效精子的数量在1亿时更加稳妥（芬兰是7千万）。　　刚刚采到的精液通过外观目测，有经验者往往可得出初步判断，再配合以镜检加以确认。　　活力：前进直线运动精子的百分数，为必测项目，不得少于70％。　　密度：每毫升精液中精子的个数，常用比色法和血细胞计数法计算，但比较繁索，可用视野精子数估测法进行估测。　　回归方程：y＝0.318732X±0.0111555；即在40×100倍显微镜下，视野精子数每增加10个时，其精液的密度增加10×106个/ml，此法虽然简单实用，但误差较大，受检测操作的影响，因此还需寻求一种更准确的方法，有待于研究。　　需要特别指出的是：在精子的活力偏低或畸型率偏高时，不能用增加输入精子的数量来弥补，否则会出现弱胎、死胎、流产等现象，不合格的精液坚决遗弃，不可迁就。　　要点：迅速；准确；高标准；不迁就。　　七、精液的稀释与保存　　　　精液稀释的目的除扩充容量外，更重要的是增加精子在离体状态下的保存时间，力求保持其受精能力。　　目前，在各种保存方法中，常温保存法效果为最佳。与冷冻保存法相比它可提高精子的利用率。在常温保存法中，不同的稀释液配方，保存效果有明显差异，因此，精子的受精能力亦有差别。好的稀释液配方应具备有可被狐的精子可利用的营养成份；保护精子的缓冲成份和针对性的抗菌成份以及改善精子所在环境的理化特性成分等。为减少配制过程的繁锁，目前普遍使用预先配制好的商品用狐专用稀释液，这种稀释液需要在特定的无菌环境下配制，所用的成份亦需要经过处理，密封保存在低温环境下。无论使用哪种稀释液，在使用前都需对其进行稀释检测以确认其保存效果。　　要点：稀释液的选择；保存效果检测；稀释液保存环境；等温稀释；稀释液的加入方法；体外保存时间确定；保存温度（缓慢降温）；无氧条件；避光；振动。　　精子的冷冻保存若通过改善工艺等方法的研究提高精子的复苏率将是一件很有意义的事情。　　八、最佳输精时间的选择　　准确的鉴定母狐的发情状态可为选择最佳的输精时机提供依据。传统的目测与放对试情法，需要花费大量的人力与时间，在大型养狐场此法更显得繁重与笨掘，与提高人工授精的工作效率不相适应，也不利于生产的集中化管理。　　挪威学者MфllerfFreysedal（1980）有关狐狸发情前后阴道电阻变化的研究以及发情测试仪的使用，增加了对母狐发情判定的直观性，这种方法目前已被众多国外的大型养狐场所接受。在我国一些场家也在使用，但还不够普遍。阴道内细胞学检查可为其它方法检测结果不确切时提供参考。　　以上检测方法都可间接的反映出母狐的排卵迹象，但总有少数例外，如二次发情等。增加输精次数虽然可在一定程度上弥补发情鉴定的误差，但又不能不考虑优质精液的浪费和对母狐生殖器官的机械性损伤。　　有关母狐的排卵持续时间和精子在母狐生殖道的存活时间目前尚无确切结论，一次性输精虽然同样可以获得较高的受孕率，但在分别使用兰狐和银黑狐精液在不同日期给同一母兰狐输精的杂交试验中，同窝后代中有的即出现了杂种狐又出现了纯种兰狐，对母狐为一次性排卵的说法提出了疑问。　　（芬兰只输精两次，隔一天，每年3月20～～4月10日）。因此，在我国我们主张应根据本场的实际情况选择鉴定方法，在大型养狐场采用以发情检测试仪测为主的综合判定法。　　要点：兰狐和银黑狐输精最佳时间的不同；发情测试仪的使用方法及注意事项；发情状况的综合判定法。　　九、子宫内输精技术　　狐的阴道内输精已被实践证实是行不通的。子宫内输精可以获得较高的受孕率，但需要操作者有一定的实践经验。正规的技术培训、大量的输精练习和实际工作可提高操作者的技术水平。　　输精部位的不准确是导致母狐受孕率低的一个主要因素，多见于初学者，一是将精液输到阴道深部，二是输精器穿破母狐生殖道将精液输入到腹腔，后者可造成母狐的感染，即使不造成死亡，也会因相应的损害以至于影响母狐下一年度的繁殖。　　要点：大量的操作练习与实际工作；温和的输精操作；准确的输精部位（插入深度、推进速度）；输精体位；不勉强操作；输精器的不重复作用，输精效果的判定（阻力、精液流向、器械与套管无残留精液，无出血现象）。　　十、污染与感染　　污染是指由于消毒不严格或不按规程操作，使用的器械或采到的精液混入了有害的病源微生物；感染是指使用了被污染的器械或精液给母狐输精后所造成的生殖器官的病理过程。其结果轻者可造成母狐空怀，生殖器官炎症；重者可造成流产，子宫化脓，以至死亡。由于输精器对生殖器官所造成的机械性损伤会激发或加重其感染的程度。　　要点：采精污染易被忽视；发情测试仪探头消毒不严格；器械消毒不严格；器械重复使用；稀释液污染；手臂消毒不严格；室温过高（或气温影响）；室内环境不卫生（外来人等定期消毒）、动物带菌（外来动物）。